【摘 要】
：
目的：基于CRISPR/Cas9技术构建高尔基体73（GP73）基因敲除小鼠模型并对其表型进行初步验证。方法：利用非同源末端连接（NHEJ）修复引入突变的方式，造成GP73基因蛋白读码框移码，使其功能缺失，针对GP73基因外显子4设计sgRNA靶位点，体外转录获得sgRNA，与编码Cas9的mRNA混合后通过受精卵显微注射方法获得F0代阳性敲除小鼠，通过繁育及基因型鉴定获得GP73基因敲除纯合子小
【基金项目】
：
区域性高发肿瘤早期防治研究教育部重点实验室子课题（No.GKE2019-06;No.GEK-ZZ202004）；
论文部分内容阅读
目的：基于CRISPR/Cas9技术构建高尔基体73（GP73）基因敲除小鼠模型并对其表型进行初步验证。方法：利用非同源末端连接（NHEJ）修复引入突变的方式，造成GP73基因蛋白读码框移码，使其功能缺失，针对GP73基因外显子4设计sgRNA靶位点，体外转录获得sgRNA，与编码Cas9的mRNA混合后通过受精卵显微注射方法获得F0代阳性敲除小鼠，通过繁育及基因型鉴定获得GP73基因敲除纯合子小鼠(GP73-/-小鼠)。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测肝、肾、皮下脂肪、棕色脂肪组织中GP73 mRNA表达，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清GP73蛋白水平。结果：与野生型（WT）小鼠相比，GP73-/-小鼠肝、肾、皮下脂肪、棕色脂肪组织GP73 mRNA及蛋白表达水平降低，血清GP73蛋白水平降低（均P＜0.05）。结论：基于CRISPR/Cas9技术成功构建了GP73基因敲除小鼠。
其他文献
＜正＞STEM教育,是当下国际教育界高度关注的热点议题。它以项目式学习（PBL）为出发点,重在培养学生科学（Science）、技术（Technology）、工程（Engineering）、艺术（Art）、数学（Mathematics）等方面的素养,注重发展学生的批判性思维、交往与合作能力和问题解决能力。IF想象未来课程（Project Imagine the Future-"IF"）是一套基于跨学
＜正＞近年来，经济环境不断变化，市场竞争日渐激烈，制造业出现了供大于求的情况，使得一些制造企业经营绩效持续降低。新时期环境下，制造企业若想不断向前发展，获得更高的经营绩效水平，应全面分析可能会对经营绩效产生影响的因素，积极探究自身经营绩效管理中的不足，并制定出针对性的经营绩效管理措施，进而充分发挥出绩效管理在制造企业经营中的作用与价值。绩效管理属于企业经营管理中的核心内容，在企业发展中发挥着重要作
依据《新课程标准》精神,坚持"健康第一"的指导思想和理念,体育教师在教学过程中以拓展训练作为教学特点与传统的体育教学方式相结合,设计适合学生发展的训练内容,使学生在增强个人品质的同时综合素质全面发展。
通过对1987年以来以监狱警察为核心研究对象的期刊论文年发文量、期刊分布、机构分布、作者分布等内容进行计量分析，发现监狱警察研究已基本形成了一个托马斯·库恩式的学术共同体，但是作为一个研究领域尚未发展成熟。在防疫、封闭执勤模式常态化背景下，监狱警察研究要基于国家治理体系和治理能力现代化语境，更多地从法学、社会学和行政学交叉的视角开展深入研究，提升研究成果的学术水平和现实意义。
目的 分析人工耳蜗植入术后并发症发生的特点，为预防及处理并发症提供临床经验及参考。方法 回顾2013年11月～2020年11月970例在四川省八一康复中心医院行人工耳蜗植入术患者的临床资料，对其进行分析。结果 85例（8.8%）患者出现术后并发症，6例患者出现2种并发症，其中眩晕26例，急性中耳炎14例、皮下血肿21例、面神经麻痹1例、异位植入2例、皮肤感染7例、植入体装置故障20例。结论 人工耳
近年来,随着互联网的高速发展,电商网站用户量不断攀升。在疫情时代,企业对生鲜电商平台的需求变得更为突出。需要为中小型企业快速开发出生鲜电商平台。且能够应对封闭社区大量用户同时高并发购物的情境和随之带来的维护成本问题。本文提出一种基于SSM框架（Spring+Spring MVC+My Batis）技术和面向服务分布式集群技术的B2C（Business-to-Consumer企业对消费者的一种电子商
从项目式学习在高中生物学单元教学中的意义以及项目式学习的实施策略等方面,阐述高中生物学课堂实施项目式学习模式的具体做法,引导学生深度理解学科大概念,提升生物学学科核心素养。
幼儿是祖国的未来与希望,幼儿园的首要工作就是促进幼儿健康成长,因此安全管理工作应该处于园区各项工作的首位,但从近些年的媒体报道中可以发现,现下园区幼儿安全管理现状依旧令人担忧,这一度引发了社会对幼儿安全问题的质疑,为此对新时代幼儿园标准化安全管理做出相关探索研究。
目的评估术后早期功能锻炼对锁骨钩钢板治疗锁骨远端骨折及肩锁关节脱位疗效的影响。方法对62例锁骨远端骨折及肩锁关节脱位采用锁骨钩钢板联合术后早期功能锻炼（观察组）;对照组60例仅采用锁骨钩钢板手术治疗。分别于术后14 d和术后6个月对患者的疗效进行评定。结果术后14 d观察驵疗效优于对照组,活动范围的改善程度也优于对照组。术后6个月,两组差异无显著性意义,观察组外展上举范围仍优于对照组。结论锁骨钩钢
目的：探讨Orem模式下的运动康复护理对慢性心力衰竭患者自我效能、运动功能及生活质量的影响。方法：选取2019年1月1日～2020年12月31日急诊病区收治的80例慢性心力衰竭患者作为研究对象，按照入院顺序分为对照组和观察组各40例，对照组采用常规护理，观察组在此基础上采用Orem模式下的运动康复护理；比较两组治疗前后自我效能[采用自我效能量表（GSES）]、运动功能（采用6分钟步行总距离测试）、