羊膜移植治疗大鼠角膜碱烧伤后羊膜转归的研究

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目的 比较嵌入法、覆盖法及无缝线三种羊膜移植方法治疗大鼠角膜碱烧伤模型在手术时间、羊膜溶解时间以及羊膜溶解后与角膜融合的位置关系的区别,为临床不同羊膜移植方法的选择提供实验依据.方法 实验研究.将SD大鼠随机分为5组,分别为A组(角膜单纯碱烧伤)、B组(嵌入法)、C组(覆盖法)、D组(无缝线)、E正常对照组.将A、B、C、D组制备角膜碱烧伤模型,B、C、D组24 h内分别行嵌入法、覆盖法及无缝线羊膜移植术,记录手术时间,术后裂隙灯显微镜观察术眼羊膜情况,以羊膜4/5以上溶解为时间点记录羊膜溶解时间,对羊膜融解后的角膜进行HE染色及免疫组织化学染色并进行半定量分析,观察羊膜融解后羊膜组织在角膜中是否存在,以及在角膜中存在的位置.手术时间及溶解时间的比较采用单因素方差分析,免疫组织化学染色结果及角膜融合位置关系采用多组秩和检验.结果 (1)无缝线羊膜移植手术时间为(9.875±1.246) min,较嵌入法羊膜移植手术时间( 35.500 ±2.878) min和覆盖法羊膜移植手术时间(33.375±2.973) min明显缩短;(2)三种羊膜移植方法术后羊膜溶解时间不同,嵌入法羊膜移植术后羊膜溶解时间为(16.625 ±3.662)d;覆盖法羊膜移植术后羊膜溶解时间为(9.250±2.188)d;无缝线法羊膜移植术后羊膜溶解时间为( 12.833±2.483)d.3种方法羊膜移植术后羊膜溶解时间差异有统计学意义(F=13.067,P<0.00l),且各组间羊膜移植术后羊膜溶解时间差异均有统计学意义,其中嵌入法羊膜移植术后羊膜溶解时间最长,覆盖法羊膜移植术后羊膜溶解时间最短;(3)HE染色可见传统方法羊膜移植手术中缝线部位有大量炎性细胞浸润,而无缝线羊膜移植中无明显炎症反应;(4)羊膜溶解后羊膜与角膜融合的位置关系可分为三种,即羊膜位于角膜上皮表面、角膜上皮层间及角膜基质间,且同一种羊膜移植方法中羊膜与角膜融合的位置关系可以是以上3种位置关系中的一种或多种同时存在,但差异无统计学意义(H=4.206,P=0.122).结论 羊膜溶解后可存在于角膜组织中,无缝线羊膜移植较传统羊膜移植方法手术时间短、炎症反应轻,在角膜视路病变治疗中具有更广阔的应用前景.
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