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[摘要] 目的观察姜黄素对动脉粥样硬化(AS)家兔血脂和血管内皮功能的影响。方法 复制As模型家兔20只随机分两组，治疗组(10只)和对照组(10只)，均予基础饲料喂养，治疗组每日加予姜黄素200rag灌胃一次，对照组每日给予生理盐水灌胃一次，治程1个月。治疗前后观察血浆甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血管性血友病因子(vWF)、组织型纤溶酶原激活物(t—PA)和纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)的变化。结果 治程结束时治疗组、对照组各8只家兔进入统计学分析。治疗组较对照组显著降低血浆TC、TC、LDL-C及升高HDL-C水平(P<0．05)，PAl-1水平和PAl-1／t—PA比值下降(P<0．01)。结论 姜黄素有显著的降低TC、LDLC、TC和升高HDLC的作用，一定程度上改善血管内皮功能作用。
[关键词]姜黄素；动脉粥样硬化；血管内皮功能；家兔
中图分类号：R543．5 文献标识码：A 文章编号：1009-816X(2007)02)0089-03
血管内皮细胞不仅可提供血管内壁光滑的表面和选择性渗透的屏障，而且还具有保持血管张力、保持血液流动和凝血功能平衡、调节血管炎症反应等作用。内皮细胞损伤会引起内皮功能障碍，产生各种细胞因子，促进动脉粥样硬化发生和发展[1]。姜黄素具有降血脂、抗氧化、抗炎、清除氧自由基等作用，Quiles等[2]实验表明姜黄素能减轻家兔动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)病变程度。本文以喂食高脂饲料家兔建立As模型，观察姜黄素对家兔血脂和血管内皮功能的影响，来探讨姜黄素抗AS的可能机制。
1材料与方法
1．1材料：日本大耳白家兔由温州医学院动物实验中心提供，浙医动字2200300002，并在该动物实验中心饲养。高脂饲料组成：84％基础饲料，10％猪油，5％红糖，1％胆固醇(第二军医大学免疫学研究所)；姜黄素由神威药业有限公司提供。t—PA、PAI—l、vWF测定试剂盒(上海太阳生物技术有限公司)；美国ABBOTF C8000全自动生化仪、Biocell酶标仪和EGATE2310全自动微孔洗涤机(温州市中医院提供)。
1．2方法：
1．2．1 AS模型的复制：30只雄性、体重1．7～2．1kg、2～3月龄的日本大耳白家兔，给予基础颗粒饲料适应性喂养1周。给予高脂饲料，单笼喂养，每日每兔进食量为150g，饮水不限。造AS模型过程中兔子死亡7只，2月后随机抽取3只家兔处死，肉眼观察主动脉壁均有斑块形成确认As模型建立。余20只As模型家兔随机分成对照组(10只)和姜黄素治疗组(10只)。两组均给予基础颗粒饲料喂养，每日150g。治疗组每日给予姜黄素200mg／kg灌胃；对照组每日给予生理盐水灌胃，持续治疗1月。
1．2．2血脂及细胞因子测定：分别于第2月末(即姜黄素治疗前)禁食12小时后，取家兔耳缘静脉采血2ml；第3个月(即姜黄素治疗后)禁食12小时采心脏血2ml。(1)全自动生化检测仪测定血清TG、TC、HDL-C、LDL-C；(2)酶联免疫吸附双抗体夹心法，在酶标仪上490nm处以空白对照孔调零，测定血浆组织型纤溶酶原激活物(t—PA)、纤溶酶原激活抑制物(PAI—1)、血友病因子(vWF)浓度，严格按试剂盒说明书进行。
观察治疗组和对照组姜黄素治疗前后血脂TG、TC、HDL-C、LDL-C和t—PA、PAI－1、vWF的变化。
1．3统计学处理
实验数据计量资料以均数±标准差(x±s)表示，同组治疗前后用配对t检验，组间用两独立样本的t检验并进行方差齐性F检验。所有统计学处理采用SPSSll.5软件处理。
2结果
2．1一般情况：在姜黄素药物治疗期间，因灌胃导致兔死亡治疗组2只、对照组1只，对照组1只兔子因肢体偏瘫最终死亡，最后治疗组和对照组各有8只动物进入统计学分析。实验开始前、第2月末和第3月末，两组家兔体重无统计学差异(P>0．05)。
2．2血脂变化：经高脂饲料喂养2个月后即姜黄素治疗前两组兔血浆TG、TC、LDLC、HDLC明显升高，但两组比较无统计学显著性差异(p>0．05)。经姜黄素治疗1月后，治疗组各项血脂指标均有不同程度改善，对照组改喂基础颗粒饲料血脂指标亦有不同程度改善。但姜黄素治疗组比对照组降低TC、LDL-C、TG，具有统计学显著性差异(P<0．05)；升高HDL-C，具有统计学显著性差异(P<0．05)。见表l。
2．3姜黄素对t-PA、PAI-1、vWF的影响：治疗前两组t—PA、PAI—l、vWF无统计学显著性差异(P>O．05)。治疗后t—PA两组无统计学显著性差异(P>0．05)，但PAI—l在治疗组显著性下降
3讨论
本文结果显示姜黄素能显著降低血浆TC、TG、LDLC；升高血浆HDLC，与国内外研究相似[3，4]。姜黄素降脂的可能机制为：(1)影响脂蛋白相关代谢酶的活性[3]。姜黄素能显著提高食饵性高脂血症大鼠血浆卵磷脂胆固醇酰基转移酶和总脂解酶活性，同时降低血浆游离胆固醇。(2)改善载脂蛋白含量。高脂血症大鼠喂饲姜黄素可使血载脂蛋白A含量升高，载脂蛋白B含量降低[5]。增加载脂蛋白A1含量而升高HDL，降低载脂蛋白B而降低LDL水平。(3)姜黄素降脂作用可能与其促进胆囊对胆固醇的排泄有关[4]。
纖溶系统是体内抵抗血栓形成的主要防御机制，而纤溶活性主要由t-PA和PAI-1决定，PAl-l含量与活性增高使纤溶功能降低，t-PA则相反。而t-PA和PAI-1是内皮细胞分泌的两个重要的生物活性因子。vWF是内皮细胞合成并储存在内皮细胞内，当内皮细胞受损时vWF大量释放入血，血浆vWF水平升高，可以作为内皮受损的标志物[6]。因此，通过测定血浆t-PA、PAl-l、vWF水平的变化来检测血管内皮功能的变化。孙秀才等[7]发现姜黄素降低高脂血症兔的vWF水平和升高NO水平，改善内皮功能。沃兴德等[8]研究表明姜黄素降低高脂血症兔血浆PAI-(P<0．01)，PAI-1／t-PA比值改善(P<0．01)，vWF在治疗组有下降趋势(P=0．05)，表明姜黄素能部分纠正AS家兔的血管内皮活性物质紊乱，改善内皮功能。见表2。
1活性和提高t—PA的活性，使血浆纤维蛋白原含量降低，纠正高凝状态。本文发现姜黄素能降低AS模型家兔血浆PAI-1水平，改善PAI-i／t-PA(P<0．01)，血浆vWF水平也有下降趋势(P=O．05)，但对血浆t-PA水平无影响(P>O．05)，其原因尚待研究。
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[关键词]姜黄素；动脉粥样硬化；血管内皮功能；家兔
中图分类号：R543．5 文献标识码：A 文章编号：1009-816X(2007)02)0089-03
血管内皮细胞不仅可提供血管内壁光滑的表面和选择性渗透的屏障，而且还具有保持血管张力、保持血液流动和凝血功能平衡、调节血管炎症反应等作用。内皮细胞损伤会引起内皮功能障碍，产生各种细胞因子，促进动脉粥样硬化发生和发展[1]。姜黄素具有降血脂、抗氧化、抗炎、清除氧自由基等作用，Quiles等[2]实验表明姜黄素能减轻家兔动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)病变程度。本文以喂食高脂饲料家兔建立As模型，观察姜黄素对家兔血脂和血管内皮功能的影响，来探讨姜黄素抗AS的可能机制。
1材料与方法
1．1材料：日本大耳白家兔由温州医学院动物实验中心提供，浙医动字2200300002，并在该动物实验中心饲养。高脂饲料组成：84％基础饲料，10％猪油，5％红糖，1％胆固醇(第二军医大学免疫学研究所)；姜黄素由神威药业有限公司提供。t—PA、PAI—l、vWF测定试剂盒(上海太阳生物技术有限公司)；美国ABBOTF C8000全自动生化仪、Biocell酶标仪和EGATE2310全自动微孔洗涤机(温州市中医院提供)。
1．2方法：
1．2．1 AS模型的复制：30只雄性、体重1．7～2．1kg、2～3月龄的日本大耳白家兔，给予基础颗粒饲料适应性喂养1周。给予高脂饲料，单笼喂养，每日每兔进食量为150g，饮水不限。造AS模型过程中兔子死亡7只，2月后随机抽取3只家兔处死，肉眼观察主动脉壁均有斑块形成确认As模型建立。余20只As模型家兔随机分成对照组(10只)和姜黄素治疗组(10只)。两组均给予基础颗粒饲料喂养，每日150g。治疗组每日给予姜黄素200mg／kg灌胃；对照组每日给予生理盐水灌胃，持续治疗1月。
1．2．2血脂及细胞因子测定：分别于第2月末(即姜黄素治疗前)禁食12小时后，取家兔耳缘静脉采血2ml；第3个月(即姜黄素治疗后)禁食12小时采心脏血2ml。(1)全自动生化检测仪测定血清TG、TC、HDL-C、LDL-C；(2)酶联免疫吸附双抗体夹心法，在酶标仪上490nm处以空白对照孔调零，测定血浆组织型纤溶酶原激活物(t—PA)、纤溶酶原激活抑制物(PAI—1)、血友病因子(vWF)浓度，严格按试剂盒说明书进行。
观察治疗组和对照组姜黄素治疗前后血脂TG、TC、HDL-C、LDL-C和t—PA、PAI－1、vWF的变化。
1．3统计学处理
实验数据计量资料以均数±标准差(x±s)表示，同组治疗前后用配对t检验，组间用两独立样本的t检验并进行方差齐性F检验。所有统计学处理采用SPSSll.5软件处理。
2结果
2．1一般情况：在姜黄素药物治疗期间，因灌胃导致兔死亡治疗组2只、对照组1只，对照组1只兔子因肢体偏瘫最终死亡，最后治疗组和对照组各有8只动物进入统计学分析。实验开始前、第2月末和第3月末，两组家兔体重无统计学差异(P>0．05)。
2．2血脂变化：经高脂饲料喂养2个月后即姜黄素治疗前两组兔血浆TG、TC、LDLC、HDLC明显升高，但两组比较无统计学显著性差异(p>0．05)。经姜黄素治疗1月后，治疗组各项血脂指标均有不同程度改善，对照组改喂基础颗粒饲料血脂指标亦有不同程度改善。但姜黄素治疗组比对照组降低TC、LDL-C、TG，具有统计学显著性差异(P<0．05)；升高HDL-C，具有统计学显著性差异(P<0．05)。见表l。
2．3姜黄素对t-PA、PAI-1、vWF的影响：治疗前两组t—PA、PAI—l、vWF无统计学显著性差异(P>O．05)。治疗后t—PA两组无统计学显著性差异(P>0．05)，但PAI—l在治疗组显著性下降
3讨论
本文结果显示姜黄素能显著降低血浆TC、TG、LDLC；升高血浆HDLC，与国内外研究相似[3，4]。姜黄素降脂的可能机制为：(1)影响脂蛋白相关代谢酶的活性[3]。姜黄素能显著提高食饵性高脂血症大鼠血浆卵磷脂胆固醇酰基转移酶和总脂解酶活性，同时降低血浆游离胆固醇。(2)改善载脂蛋白含量。高脂血症大鼠喂饲姜黄素可使血载脂蛋白A含量升高，载脂蛋白B含量降低[5]。增加载脂蛋白A1含量而升高HDL，降低载脂蛋白B而降低LDL水平。(3)姜黄素降脂作用可能与其促进胆囊对胆固醇的排泄有关[4]。
纖溶系统是体内抵抗血栓形成的主要防御机制，而纤溶活性主要由t-PA和PAI-1决定，PAl-l含量与活性增高使纤溶功能降低，t-PA则相反。而t-PA和PAI-1是内皮细胞分泌的两个重要的生物活性因子。vWF是内皮细胞合成并储存在内皮细胞内，当内皮细胞受损时vWF大量释放入血，血浆vWF水平升高，可以作为内皮受损的标志物[6]。因此，通过测定血浆t-PA、PAl-l、vWF水平的变化来检测血管内皮功能的变化。孙秀才等[7]发现姜黄素降低高脂血症兔的vWF水平和升高NO水平，改善内皮功能。沃兴德等[8]研究表明姜黄素降低高脂血症兔血浆PAI-(P<0．01)，PAI-1／t-PA比值改善(P<0．01)，vWF在治疗组有下降趋势(P=0．05)，表明姜黄素能部分纠正AS家兔的血管内皮活性物质紊乱，改善内皮功能。见表2。
1活性和提高t—PA的活性，使血浆纤维蛋白原含量降低，纠正高凝状态。本文发现姜黄素能降低AS模型家兔血浆PAI-1水平，改善PAI-i／t-PA(P<0．01)，血浆vWF水平也有下降趋势(P=O．05)，但对血浆t-PA水平无影响(P>O．05)，其原因尚待研究。
本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文