【摘 要】
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目的 通过建立新生小鼠巨细胞病毒(CMV)肝炎模型,检测黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的表达水平,探讨其在CMV肝炎中的作用及意义,为寻找治疗
【机 构】
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徐州市儿童医院,江苏徐州,221000;徐州医科大学附属医院新生儿科,江苏徐州,221002
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目的 通过建立新生小鼠巨细胞病毒(CMV)肝炎模型,检测黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)的表达水平,探讨其在CMV肝炎中的作用及意义,为寻找治疗CMV肝炎新靶点提供理论依据.方法 48只新生BALB/c小鼠随机分为观察组及对照组,各24只,每组又按照3d、7d、14 d分为三个亚组,每组各8只.观察组于生后12 h内腹腔注射组织半数细胞感染量(TCID50)为104.44 U/ml的CMV悬液20μl,建立CMV肝炎模型,对照组腹腔注射等容积无菌生理盐水,于造模后3d、7d、14 d留取静脉血及肝组织,HE染色观察肝脏病理变化,ELISA法检测血清谷丙转氨酶(ALT)表达水平,PCR检测肝组织CMV-DNA表达,Western blot检测肝组织AIM2、Caspase-1表达水平及变化.结果 CMV感染后,相较对照组,观察组小鼠出现皮毛稀疏、纳差、少动、反应差、生长发育落后等表现.观察组小鼠肝组织HE染色可见明显病理损害,对照组未见明显异常.观察组各时间点小鼠肝脏组织CMV-DNAPCR电泳均见阳性条带,对照组无相应条带.观察组小鼠肝脏组织中AIM2、Caspase-1表达明显高于对照组,且各时间点间差异有统计学意义(均P＜0.05);观察组表达于3d时可见升高,7d时达峰值,14 d时较前降低,差异有统计学意义(均P＜0.05).观察组小鼠血清ALT水平明显高于对照组,且各时间点间差异有统计学意义(均P＜0.05),观察组3d时可见升高,7d时达最高,14 d时较前下降,差异有统计学意义(均P＜0.05).观察组小鼠肝脏组织中AIM2、Caspase-1蛋白表达量与血清ALT呈正相关性(均P＜0.05).结论 AIM2炎症体介导的细胞焦亡程序可能为CMV肝炎的致病机制之一,且肝脏组织中AIM2、Caspase-1表达越高,肝细胞损伤越重.
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