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本试验优化了含有原核质粒pET-A/D的B121(DE3)大肠杆菌的表达条件,结果表明诱导的最佳时间和诱导剂IPTG的最佳用量分别为3h和0.1mmol/L。在此基础上,大量诱导表达蛋白质后用Ni-IDA蛋白质层析柱进行纯化,Western-blot鉴定纯化蛋白具有抗原活性,方阵滴定法确定了重组蛋白的最佳包被量为0.5μg/孔。应用建立的ELISA方法对规模化猪场仔猪母源抗体消长进行了监测,确定了猪瘟疫苗的首免时间为42日龄。研究结果表明,ELISA方法操作简便、快速、敏感性高、特异性强等优点,适合基层兽