HTLV-1 Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控机制的研究

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuang321
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目的 探讨成人T淋巴细胞白血病病毒1型( HTLV-1病毒) Tax蛋白阳性T细胞TaxP中早期生长反应基因-1(EGR-1)表达调控的机制。方法构建不同长度的EGR-1调控序列报告基因,将其转染TaxP细胞,加入NF-κB抑制剂BAY 11-7082或同等体积的二甲基亚砜(DMSO),24 h后收集细胞检测荧光素酶活性;TaxP细胞上清中加入BAY 11-7082或同等体积的DMSO,24 h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达;将Tax及其突变体M22和M47分别转染293 T细胞,24 h后免疫印迹检测EGR-1蛋白表达。结果成功构建了不同长度及突变体的EGR-1调控序列荧光素酶报告基因;荧光素酶报告基因检测显示:相对于E1、E2而言, E3、DelE、MutE的荧光素酶活性明显降低,加入BAY 11-7082后,E1、E2的荧光素酶活性明显降低(P<0.01),而E3、DelE、MutE无明显变化;同样地,免疫印迹检测显示加入BAY 10-7082后,EGR-1蛋白表达明显降低;相对于野生型和M47,转染M22突变体后,293 T细胞EGR-1蛋白表达明显降低。结论 NF-κB是Tax蛋白阳性T细胞中EGR-1表达调控的关键核因子。

其他文献
辅助性T细胞17( Th17)是一类特异分泌IL-17、表达Rorγt的Th亚群,由于其参与了诸多免疫性疾病的发生发展而备受研究学者的关注。 Th17在体内比率非常低,难以分离纯化,而体外的诱导率仅为10%左右,如何提高体外Th17诱导分化与增殖的效率成为了研究Th17亟待解决的问题之一。