【摘 要】
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目的制备氯霉素(Chloramphenicol,CAP)完全抗原,并对其进行鉴定。方法采用重氮化法制备免疫抗原(CAP-BSA)和检测抗原(CAP-OVA),琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE鉴定其偶联后效果;紫
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学食品学院食品科学教研室,吉林大学教育部人兽共患病重点实验室细菌室,黑龙江八一农垦大学生命科技学院,
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目的制备氯霉素(Chloramphenicol,CAP)完全抗原,并对其进行鉴定。方法采用重氮化法制备免疫抗原(CAP-BSA)和检测抗原(CAP-OVA),琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE鉴定其偶联后效果;紫外扫描法分析CAP与BSA和OVA的分子结合比;BCA法测定偶联蛋白的浓度;将CAP-BSA经小鼠腹腔免疫,采血分离血清,间接ELISA法检测小鼠血清抗体效价。结果琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE分析显示,两种完全抗原偶联成功;CAP与BSA和OVA的分子结合比分别为28︰1和21︰1,蛋白浓度分别为3.16和2.28 mg/ml;CAP-BSA能够刺激小鼠产生高效价的抗CAP抗体。结论成功制备了CAP完全抗原,为下一步获得高亲和力和高特异性的单克隆抗体奠定了基础。
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