【摘 要】
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目的：构建人角化上皮生长因子基因真核表达载体pEGFP-C2-hKGF,为以后的hKGF基因功能和基因治疗研究提供实验材料.方法：提取人胚肺成纤维细胞（HLF）总RNA,逆转录酶-多聚酶链式反应（R
【机 构】
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重庆医科大学儿童医院外科,青岛大学附属医院肝胆外科
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目的：构建人角化上皮生长因子基因真核表达载体pEGFP-C2-hKGF,为以后的hKGF基因功能和基因治疗研究提供实验材料.方法：提取人胚肺成纤维细胞（HLF）总RNA,逆转录酶-多聚酶链式反应（RT-PCR）扩增hKGF基因全长cDNA序列,经与pMD18-T载体连接、筛选、克隆、抽提质粒和双酶切后,将纯化的hKGF基因cDNA全长序列插入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C2中,筛选、克隆、抽提质粒,从而构建hKGF基因真核表达载体pEGFP-C2-hKGF.载体转染后大鼠肺泡Ⅱ型细胞进行免疫细胞化学及
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