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目的
了解16型人乳头瘤病毒(HPV16)E6/E7、HSP70与角质形成细胞永生化及转化之间的关系.
方法Lipofectamine介导法进行转染,以G418筛选阳性克隆,免疫印迹分析及免疫荧光双标记染色结合激光扫描共聚焦显微镜对HSP70和HPV16E6/E7在转染角质形成细胞中的表达进行了观察.
结果免疫印迹分析显示正常角质形成细胞和转染角质形成细胞均在相对分子质量70000处出现一条染色带,但转染细胞的着色深度明显强于正常细胞;激光扫描共聚焦显微镜观察也发现转染细胞中HSP70的表达明显增高,HSP70与HPV16E6/E7有共定位.
结论HPV16E6/E7可以诱导角质形成细胞中HSP70的高表达,这种高表达可能在角质形成细胞永生化甚至转化过程中具有重要作用.