猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法的建立

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本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCRRFLP鉴别检测方法。根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFI。P检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PCR产物进行克隆与序列分析,验证上述方法。结果RT-PCR扩增片段为825bp,产物经RFLP分析,野毒株的PCR产物能被ApaI酶切为322bp和503bp2个片段,兔化弱毒疫苗株则不能被酶切,检测出RNA的最低浓度为0.0286μg·mL^-1;8株流行野毒
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