重组鲨肝活性蛋白的分泌表达及其体外对肝细胞葡萄糖激酶活性的影响

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构建了鲨肝活性蛋白的原核分泌表达载体pET22b-S,经过周质蛋白的提取、DEAE SepharoseFF、MonoQ/AKTA explorer、Bio-gel P10的分离纯化,获得可溶性重组鲨肝活性蛋白(rSHAP).初步研究了rSt-IAP对肝细胞增殖以及肝细胞葡萄糖激酶活性的影响.结果显示rSHAP能够被成功分泌至细胞间质中,分离纯化后可获得纯度约95%的可溶rSHAP,产量约3.8 mg/L.所获得的rSHAP具有刺激SMMC-7721细胞株增殖活性,体外活性检测显示15~45μg/ml的rSHAP能够显著提高正常人肝细胞HL-7702葡萄糖激酶活性.
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