【摘 要】
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目的研究雷帕霉素诱导细胞产生自噬对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的影响。方法通过雷帕霉素诱导人肝癌细胞HepG2 2.15产生自噬,荧光显微镜和透射电镜下观察自噬
【基金项目】
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国家自然科学基金(81171628)~~
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目的研究雷帕霉素诱导细胞产生自噬对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的影响。方法通过雷帕霉素诱导人肝癌细胞HepG2 2.15产生自噬,荧光显微镜和透射电镜下观察自噬小体形成,Western blot检测诱导后HepG2 2.15细胞自噬标志蛋白LC3-II/LC3-I的表达水平;荧光定量PCR检测HBV mRNA水平;加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),Western blot检测自噬抑制后LC3-II/LC3-I的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的表达,Southern blot检测HBV DNA水平,验证HBV复制情况。结果雷帕霉素诱导后,HepG2 2.15细胞在荧光显微镜和透射电镜下观察到自噬小体的形成,LC3-II/LC3-I比值显著上升(P<0.05);细胞诱导自噬后HBsAg和HBV mRNA显著增加(P<0.05),而加入自噬抑制剂3-MA后,HBsAg和HBV DNA均显著减少(P<0.05)。结论雷帕霉素可能通过诱导细胞自噬促进HBV的复制。
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