目的探讨临床分离革兰阴性杆菌对头孢哌酮-舒巴坦、亚胺培南、美罗培南和阿米卡星的耐药性变迁。方法收集广西医科大学第一附属医院2008年1月—2013年12月临床分离的鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌。以大肠埃希菌ATCC 25922和铜绿假单胞菌ATCC 27853为细菌鉴定和药敏试验的质控菌株,采用VITEK-2 Compact将细菌鉴定到种,参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2013年标准,采用纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对头孢哌酮-舒巴坦、亚胺培南、美罗培南和阿米卡星的敏感性,采用WHONET5.6软件进行数据分析处理。结果 2008—2013年鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率分别从2.9%、5.5%、1.2%、2.8%和13.9%升至30.9%、21.2%、4.7%、11.2%和28.9%。鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对亚胺培南的耐药率分别从18.3%、12.2%、0.8%和6.1%升至77.8%、20.8%、2.3%和6.4%;对美罗培南的耐药率分别从20.7%、11.4%、1.7%和9.4%升至78.3%、22.3%、3.8%和9.9%;鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率从62.8%和11.3%升至93.5%和21.5%;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对阿米卡星的耐药率从8.5%、17.1%和29.0%下降至4.1%、6.4%和23.6%。结论鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌对头孢哌酮-舒巴坦、亚胺培南、美罗培南的耐药率逐年增高,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿米卡星的耐药率逐年下降。