目的:探索出黄连五种主要生物碱的最优提取纯化方法及含量测定方法,为制剂研究奠定基础。方法:采用HPLC进行生物碱的含量测定,以黄连五种主要生物碱加和得率为指标,优选黄连五种主要生物碱提取及纯化工艺。盐酸药根碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的浓度,分别在0. 48～4. 80、3. 52～35. 2、2. 04～20. 4、1. 72～17. 2、10. 2～102μg·m L^-1（r均大于0. 999）范围内,与峰面积呈良好的线性关系。结果:黄连提取最优的条件为黄连饮片,加8倍量1. 5%的硫酸溶液,煎煮3次,每次40 min。纯化最佳工艺为黄连提取液用Ca（OH）2调节p H 5～6,滤液加HCl调节p H 1～2,加5%NaCl,冰箱冷藏静置过夜,沉淀物干燥。结论:所建立的黄连五种主要生物碱提取纯化工艺及含量测定方法简单可靠。