【摘 要】
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目的:探讨沉默糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)基因对实验性脑出血(ICH)大鼠脑损伤的神经保护作用.方法:将40只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(sham)、脑出血组(ICH)、脑出血联
【机 构】
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唐山市工人医院神经外科二病区,唐山063000
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目的:探讨沉默糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)基因对实验性脑出血(ICH)大鼠脑损伤的神经保护作用.方法:将40只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(sham)、脑出血组(ICH)、脑出血联合GSK-3β-siRNA处理组(GSK-3β-siRNA)、脑出血联合GSK-3β-siRNA阴性序列处理组(consiGSK-3β).利用自体动脉血右侧基底节区立体定向注射的方法制备大鼠ICH模型,造模前利用侧脑室注射法给予GSK-3β-siRNA及consiGSK-3β预处理,模型制备成功后72 h采用前肢协调实验检测行为学改变;干湿重法检测大鼠脑组织含水量;real time RT-PCR检测血肿周围脑组织GSK-3β mRNA的表达,免疫组织化学染色观察自噬标志蛋白LC-3的表达;West-ern Blot检测脑出血大鼠血肿周围组织中GSK-3β、p-GSK-3β(tyr216)、Beclin-1及p62蛋白表达量.结果:与sham组相比,ICH组大鼠行为学评分显著升高(P＜0.05),脑组织含水量增加(P＜0.05),GSK-3β-siRNA组大鼠行为学评分及脑组织含水量与ICH组和consiGSK-3β组相比明显降低(P＜0.05).与sham组相比,ICH组大鼠血肿周围脑组织中GSK-3β、p-GSK-3β(tyr216)、LC-3及Beclin-1表达显著升高(P＜0.05),p62蛋白表达下调(P＜0.05);与 ICH 组和 consiGSK-3β 组比,GSK-3β-siRNA 组大鼠 GSK-3β、p-GSK-3β(tyr216)、LC-3及 Beclin-1表达进一步增加,p62的表达进一步下调(P＜0.05).结论:siRNA敲低GSK-3β基因的表达对脑出血大鼠诱导的脑损伤具有一定的神经保护作用,其机制可能与增强自噬激活相关.
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