艾滋病模型中关键指标SIV DNA绝对定量微滴式数字PCR技术的创新应用

来源 :中国比较医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cool_king_wq

【摘要】

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目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)作为关键指标,实现精准检测艾滋病动物模型中细胞及组织中SIV DNA载量,用于储存库隐匿病毒实时动态评估。方法根据成

【作者】

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张丽丽陆佳涵薛婧丛喆魏强

【机构】

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中国医学科学院医学实验动物研究所

【出处】

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中国比较医学杂志

【发表日期】

：

2020年5期

【关键词】

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微滴式数字PCR 猴免疫缺陷病毒 DNA 绝对定量 droplet digital PCR SIV DNA absolute quantification

【基金项目】

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中国医学科学院医学与健康科技创新工程重大协同创新项目(2017-I2M-1-014),十三五传染病科技重大专项(2017ZX10304402,2018ZX10101001,2018ZX10301103),国家自然科学基金(81971944)

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目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)作为关键指标,实现精准检测艾滋病动物模型中细胞及组织中SIV DNA载量,用于储存库隐匿病毒实时动态评估。方法根据成熟的qPCR方法,对微滴式dPCR的反应条件进行了优化,确定最适退火温度;通过对10倍系列稀释pGEM-SIVgag477质粒标准品的检测,确定ddPCR检测范围。并通过对若干DNA样品的多次检测,判断该检测方法的稳定性。结果ddPCR的退火温度为60℃;检测范围是0.3~3.96×104 copie

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