【摘 要】
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目的观察黄芪多糖(APS)对X线辐射骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨方向分化的影响,探讨其相关作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度APS对2 Gy X线辐射BMSCs细胞增殖能力的影
【机 构】
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甘肃中医药大学甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室,敦煌医学与转化省部共建教育部重点实验室,甘肃省空间辐射生物学重点实验室中国科学院近代物理研究所,
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目的观察黄芪多糖(APS)对X线辐射骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨方向分化的影响,探讨其相关作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度APS对2 Gy X线辐射BMSCs细胞增殖能力的影响,以筛选最佳药物浓度。将细胞分为空白组、APS组、辐射组、辐射+APS组。APS组、辐射+APS组用最佳药物浓度APS提前干预3 d,辐射组、辐射+APS组用2 Gy X线进行辐射,辐射后各组细胞均加2 m L成骨诱导液继续培养,每3 d换液1次。诱导15 d后,镜下观察细胞形态,茜素红染色检测细胞中钙结节面积,Western blot检测细胞中特异性标记蛋白骨桥蛋白(OPN)和骨钙蛋白(OCN)的表达。结果与空白组比较,辐射组细胞增殖水平明显降低(P<0.05);与辐射组比较,辐射+APS组细胞增殖水平明显升高(P<0.05);APS浓度为50μg/m L时其促进增殖作用最强,为最佳药物浓度。形态学观察显示,辐射组细胞中钙结晶沉积较空白组和APS组明显减少,辐射+APS组细胞中钙结晶沉积较辐射组明显增加。在成骨能力方面,与空白组比较,APS组细胞中钙结节面积有一定降低,而辐射组细胞中钙结节面积显著降低(P<0.05);与辐射组比较,辐射+APS组细胞中钙结节面积明显增多(P<0.05)。在成骨特异性标记蛋白表达方面,与空白组比较,APS组细胞中OPN表达略下降,OCN表达略升高;辐射组细胞中OPN和OCN表达均明显下调(P<0.05);与辐射组比较,辐射+APS组细胞中OPN和OCN表达均显著升高(P<0.05)。结论黄芪多糖对X线辐射BMSCs向成骨方向分化的潜能具有保护作用。
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