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鲨烯是一个多不饱和碳水化合物,在生物体内通过甲羟戊酸(MVA)途径或2-甲基-D-赤藓糖醇4-磷酸(MEP)途径生物合成,具有多种生理功能.利用合成生物学技术设计微生物生产鲨烯是一个有效的方法.为了增加鲨烯产量,本研究将来源于粪肠球菌(Enterococcus faecalis)的MVA上游途径和来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的MVA下游途径引入到能够生产鲨烯(0.15 mg/L)的BL21 (DE3)菌株YSS2中,产生的菌株YSS17的鲨烯产量为0.73 mg/L.为了进一步增加鲨烯的产量,将mvaS基因的丙氨酸(Ala110)突变为甘氨酸(Gly),鲨烯产量达到1.0 mg/L.通过trc启动子代替质粒pET2的MVA下游途径T7启动子,以及将MVA上游途径基因置于低拷贝质粒pACY2中,最终设计的菌株YSS20能够产生鲨烯1.68 mg/L,是菌株YSS2的11.2倍.