评估咪喹莫特联合梅花针治疗SKH-1小鼠皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)的疗效,探讨其免疫学机制。
方法将紫外线诱导成瘤的40只SKH-1皮肤鳞癌小鼠随机分4组,每组10只:对照组无处理;梅花针组:每天梅花针叩刺所有瘤体1次;咪喹莫特组:每天外涂5%咪喹莫特乳膏1次,剂量为1.2 g/kg;联合组:先梅花针叩刺所有瘤体,止血后再外涂5%咪喹莫特乳膏1次,剂量同前。各组小鼠连续治疗30 d。每日观察并拍照记录各组小鼠肿瘤形态学变化,每3 d测量1次瘤体大小,比较4组瘤体体积变化及小鼠生存率变化。治疗结束后取各组小鼠瘤体,比较4组瘤体组织病理学变化。实时荧光定量PCR检测各组小鼠瘤体内干扰素(IFN)-α、IFN-β、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及IL-12 mRNA表达。
结果联合组小鼠背部瘤体生长缓慢,部分小的瘤体有消退现象;对照组、梅花针组和咪喹莫特组瘤体一直在增长,但梅花针组、咪喹莫特组生长速度较对照组慢。治疗前,4组小鼠瘤体体积差异无统计学意义(F= 0.90,P > 0.05)。治疗24 d后,4组小鼠瘤体体积差异有统计学意义(F= 5.16,P < 0.05),LSD-t检验示,联合组瘤体体积显著低于对照组(P < 0.01),余各组间差异均无统计学意义(P > 0.05)。经Log-rank检验,4组小鼠生存率曲线分布不同(χ2= 8.32,P < 0.05),联合组生存情况优于对照组(χ2= 4.62,P= 0.03),而梅花针组、咪喹莫特组与对照组、联合组比较,小鼠生存率差异均无统计学意义(P > 0.05)。组织病理学检查显示,对照组、梅花针组细胞异形性明显,排列密集,可见大量的肿瘤细胞,部分可见角化珠,咪喹莫特组肿瘤细胞少许死亡;联合组肿瘤细胞大量死亡,核异形不明显,角化增多。实时荧光定量PCR显示,联合组IFN-α、IFN-β、IL-12、IL-1β及TNF-α mRNA相对表达量均显著高于对照组、梅花针组和咪喹莫特组(均P < 0.05),咪喹莫特组IL-1β mRNA相对表达量显著高于对照组(P < 0.01),余各组间比较差异均无统计学意义(P > 0.05)。
结论梅花针叩刺能有效增强咪喹莫特抗SKH-1小鼠皮肤鳞癌活性及免疫学效应。