pcDNA3．1（-）／UBE2C质粒在Chang Liver细胞中的表达和鉴定

来源 :广东医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cyh

【摘要】

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目的构建peDNA3．1（-）／UBE2C真核表达质粒并建立人正常肝细胞Chang Liver的稳定表达株。方法采用RT—PCR法从HepG2细胞中克隆得到UBE2C eDNA全长序列，将它与pMD18-T载体连接。双酶

【作者】

：

黄湘谭家余乔亚峰王穗海邱玉林李明

【机构】

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嘉应学院医学院基础部病原教研室,南方医科大学生物技术学院

【出处】

：

广东医学

【发表日期】

：

2009年10期

【关键词】

：

UBE2C 真核表达质粒 CHANG LIVER 构建表达

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目的构建peDNA3．1（-）／UBE2C真核表达质粒并建立人正常肝细胞Chang Liver的稳定表达株。方法采用RT—PCR法从HepG2细胞中克隆得到UBE2C eDNA全长序列，将它与pMD18-T载体连接。双酶切和测序鉴定后，再将UBE2C片段亚克隆到真核表达载体peDNA3．1（-）。构建好的peDNA3．1（-）／UBE2C真核表达质粒经双酶切和测序鉴定后，采用脂质体法将其转入ChangLiver细胞株中，经G418筛选，得到阳性克隆细胞株，再用Western blot法检测转染后UBE2C

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