堆肥未培养细菌的宏基因组文库构建及新的木聚糖酶基因的克隆和鉴定

来源 :广西科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fannao3562

【摘要】

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从自制堆肥样品中提取未培养细菌的总DNA,用柯斯质粒pWEB∷TNC为载体构建宏基因组文库,对文库进行筛选获得表达木聚糖酶活性的克隆,再进行亚克隆、测序分析以及Blastx搜索Gen

【作者】

：

张鹏段承杰庞浩封毅靳振江许跃强莫新春

【机构】

：

广西亚热带生物资源保护利用重点实验室（广西大学）,广西大学生命科学与技术学院

【出处】

：

广西科学

【发表日期】

：

2005年4期

【关键词】

：

细菌宏基因组文库木聚糖酶基因 bacteria metagenomic library xylanase gene

【基金项目】

：

国家科技攻关项目，国际科技合作重点项目

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从自制堆肥样品中提取未培养细菌的总DNA,用柯斯质粒pWEB∷TNC为载体构建宏基因组文库,对文库进行筛选获得表达木聚糖酶活性的克隆,再进行亚克隆、测序分析以及Blastx搜索GenBank分析木聚糖酶基因.结果构建得到一个包含约5万个克隆的宏基因组文库,文库中外源DNA总容量约为1.8×106 kb,获得2个表达木聚糖酶活性的克隆:pGXN1050和pGXN1051,鉴定分析表明:pGXN1050上潜在的木聚糖酶基因umxyn11A具1个771bp的ORF(Open Reading Frame

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