【摘 要】
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本实验利用PCR方法扩增1株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)源的内切葡聚糖酶基因(CMCase),插入到pET32a(+)中构建重组表达大肠杆菌系统,对重组内切葡聚糖酶基因进行生物
【机 构】
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吉林省农业科学院畜牧科学分院,山东宝来利来生物工程股份有限公司,吉林农业大学动物科学技术学院
【基金项目】
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吉林省科技厅重点科技研发项目（20180201042NY）;吉林省农业科学院创新工程项目（CXG C2017JQ003）;吉林省科技厅国际科技合作项目（20160414042GH）;安全绿色饲料添加剂中试中心项目（20160626002NY）
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本实验利用PCR方法扩增1株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)源的内切葡聚糖酶基因(CMCase),插入到pET32a(+)中构建重组表达大肠杆菌系统,对重组内切葡聚糖酶基因进行生物信息学分析以及酶学性质研究。结果表明:内切葡聚糖酶由499个氨基酸组成,预测分子量为55.02 ku,最大开放阅读框ORF约为1 500 bp。经诱导表达优化后,培养上清中可检测到内切葡聚糖酶酶活力为5.81 IU/mL,菌体中为1.61 IU/mL,诱导后原菌液直接超声破碎处理可达7.41 IU/mL,
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