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拟南芥Alpha-dioxygenase 2原核表达、纯化及亚细胞定位预测

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Eryuelan

【摘 要】

：

将拟南芥α-dioxygenase2（DOX2）基因编码区克隆到原核表达载体pGEX-5X-1获得重组表达载体pGEX-DOX2,转化至大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）pLysS和BL21（DE3）-RIPL codon＋菌株中进

【作 者】

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张美祥  张小梅  范三红  罗龙海  闫晓华  郭蔼光 

【机 构】

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西北农林科技大学陕西省农业分子生物学重点实验室,河南科技大学农学院

【出 处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

：

α-DOX2 表达 稀有密码子 亲和纯化 亚细胞定位 

【基金项目】

：

国家自然科学基金(No.30300222);西北农林科技大学优秀人才基金(No.042R009)资助

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将拟南芥α-dioxygenase2（DOX2）基因编码区克隆到原核表达载体pGEX-5X-1获得重组表达载体pGEX-DOX2,转化至大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）pLysS和BL21（DE3）-RIPL codon＋菌株中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot结果表明,融合蛋白在BL21（DE3）-RIPL codon＋中得到了高效表达,融合蛋白表观分子量约为98kD,占菌体总蛋白的38%。经GST亲和柱层析进一步纯化获得了可溶性重组蛋白;愈创木酚法测

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