【摘 要】
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目的 探讨活性氧在血小板凋亡中的调控作用.方法 健康人洗涤血小板用N-乙酰半胱氨酸(NAC)、辛可卡因和凝血酶单独或联合处理.用活性氧检测试剂盒结合流式细胞术检测血小板活性氧的产生和线粒体膜电位(△Ψm)的改变,用Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及抗凋亡蛋白Bcl-xL的表达情况.结果 ①NAC+辛可卡因组活性氧荧光值低于单用辛可卡因组(0.66±0.11
【机 构】
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苏州大学放射医学与防护学院,215006苏州大学附属第一医院、江苏血液研究所，卫生部血栓与止血重点实验室,215006苏州大学附属第一医院、江苏血液研究所，卫生部血栓与止血重点实验室,苏州大学放射医学
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目的 探讨活性氧在血小板凋亡中的调控作用.方法 健康人洗涤血小板用N-乙酰半胱氨酸(NAC)、辛可卡因和凝血酶单独或联合处理.用活性氧检测试剂盒结合流式细胞术检测血小板活性氧的产生和线粒体膜电位(△Ψm)的改变,用Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及抗凋亡蛋白Bcl-xL的表达情况.结果 ①NAC+辛可卡因组活性氧荧光值低于单用辛可卡因组(0.66±0.11对1.06±0.08,P=0.001),NAC+凝血酶组活性氧荧光值低于单用凝血酶组(0.45±0.05对0.71±0.11,P=0.001).②NAC+辛可卡因组线粒体膜电位正常的血小板百分数高于单用辛可卡因组[(86.30±9.37)％对(13.52±3.01)％,P＝0,000],NAC+凝血酶组高于单用凝血酶组[(93.00±3.03)％对(76.58±5.28)％,P＝0.000].③单用辛可卡因组caspase-3活化后的裂解片段明显多于DMSO对照组,NAC+辛可卡因组caspase-3活化后的裂解片段明显减少.④NAC+辛可卡因组Bcl-xL的表达较单用辛可卡因组明显增多,NAC+凝血酶组Bcl-xL的表达高于单用凝血酶组.结论 NAC对辛可卡因或凝血酶引起的血小板凋亡具有明显的抑制作用,这种抑制作用主要是通过对活性氧的调控而实现的。
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