HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶在大肠杆菌中表达、纯化

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在大肠杆菌中HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶获得表达并进行纯化。根据NS3与NSgA两者形成异源二聚体的结构要求,并参照文献,通过基因拼接的方法设计了单链NS3/4A丝氨酸蛋白酶的基因。合成相应引物,利用反转录PCR从HCV患者血液中扩增出该蛋白酶的编码基因,克隆入原核表达载体pRSET—A,将重组表达质粒pRSET—A—ns3/4a转化BL21^1(DE3)大肠杆菌,并诱导表达与纯化。成功地构建了重组表达质粒pRSET-A—ns3/4a;重组质粒转化的B121工程菌经IPTG诱导表达后,表达产物经SDS
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