人IL-10逆转录病毒载体的构建及对大鼠原位肝移植存活期的影响

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目的探讨人白细胞介素10(hlL-10)逆转录病毒载体的构建及对大鼠原位肝移植存活期的影响.方法将hIL-10克隆基因片断,经双酶切后定向插入到逆转录病毒载体(MSCV)中,用脂质体法转染PT67包装细胞,以G418筛选阳性克隆.将wistar对SD大鼠原位肝移植模型分三组,组I为空白对照组,组Ⅱ为MSCV空载体灌洗组,组Ⅲ为MSCV-hIL-10灌洗组.观察大鼠存活期及肝脏功能变化.结果hIL-10基因片断插入到MSCV载体中经转染包装后得到2×107 CFU/ml的分泌hIL-10的病毒悬液,hIL-l0分泌量为1220ng/106细胞/24h.组Ⅲ与组I、组Ⅱ比,大鼠存活期明显延长(P<0.01),肝脏功能无明显差异.结论获得MSCV-hIL-10重组质粒,获得高滴度的分泌hIL-10的病毒悬液,hIL-10的表达可延长大鼠原位肝移植的存活期.

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