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目的 分析miR-499检测在急性心肌梗死诊断中的应用价值.方法 设计miR-499的颈环结构反转录引物和PCR扩增引物,采用TaqMan探针时荧光定量PCR法检测急性心肌梗死(AMI)组(40例)、不稳定心绞痛(UA)组(40例)和健康对照组(40例)血清标本中miR-499的含量变化.结果 miR-499标准曲线CT值与其浓度相关性好,标准曲线的斜率为-3.428,扩增效率为0.95775,R值为0.999.为了研究miR-499检测方法的建立,以便达到稳定的检测效果,本研究尝试通过实时荧光定量PCR方法进行条件优化,将miR-499的标准品稀释成不同浓度,并用4种不同浓度的miR-499标准品制作标准曲线,miR-499标准曲线CT值与其浓度相关性好,标准曲线的斜率为-3.428,扩增效率为0.95775.R值为0.999.AMI组中miR-499的表达量为(14013±976.3)copies/ml,UA组miR-499的表达量为(2522.3±514.2)copies/ml,健康对照组miR-499表达量为(2465.8±150.0)copies/ml.AMI组miR-499水平明显高于UA组和健康对照组,差异有统计学意义(P0.05).结论 成功建立了TaqMan探针荧光定量PCR法检测人血清中miR-499含量的平台,miR-499有可能成为一种新型且敏感的诊断急性心肌梗死的生物标志物.