论文部分内容阅读
目的 观察人类神经生长因子β基因(human beta-nerve growth factor,hNGFβ)转染对爆震性听力损伤毛细胞的保护作用.方法 选用20只白色纯种豚鼠,制备豚鼠爆震性耳聋模型(172dB SPL),爆震前后分别行听觉脑干诱发电位(ABR)检测,选爆震前后听阈阈移大于75 dB SPL的豚鼠,共15只,随机分为2组,其中I组10只,为实验组(导入目的基因Ad-hNGFβ),Ⅱ组5只,为人工外淋巴液(artificial perilymphatic fluid,APF)对照组(导入APF);另外选正常白色纯种豚鼠5只,作为正常组,不接受爆震和转染.进行爆震前和基因转染后ABR反应阈测定、耳蜗电镜扫描观察及免疫组织化学染色检测Ad-hNGFβ蛋白表达.结果 基因导入后第1周,可见Ad-hNGFβ在豚鼠耳蜗内成功转染,耳蜗各回均有表达,强度基本相等.基因导入后第1周,I组豚鼠ABR反应阈恢复显著快于Ⅱ组豚鼠ABR反应阈;4周后,I组豚鼠ABR已恢复正常水平,而Ⅱ组豚鼠ABR未能恢复正常水平.扫描电镜示,基因导入后第1周,I组豚鼠外毛细胞静纤毛有轻度紊乱及松散,Ⅱ组豚鼠外毛细胞静纤毛排裂扭曲、倒伏、紊乱、融合及部分缺失;4周后,I组豚鼠外毛细胞静纤毛病变完全恢复,Ⅱ组豚鼠外毛细胞静纤毛病变减轻,部分病变没有完全恢复.结论 腺病毒介导的hNGFβ基因在爆震损伤后豚鼠耳蜗中能高效表达,对听觉有明显的保护作用。