中国明对虾蜕皮抑制激素在大肠杆菌中的表达与分离纯化

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采用大肠杆菌表达系统对中国明对虾蜕皮抑制激素(MIH)进行了体外重组表达研究。重组蛋白以包涵体的形式存在于菌体中。尿素-SDS-PAGE分析表明,经1mmol/L的IPTG诱导4h后,重组蛋白获得了大量表达,在分子量为13kD处有一条与预测大小一致的特异性蛋白条带;经金属螯合柱纯化后,得到了电泳纯的融合蛋白。Western blotting检测结果表明:重组表达的融合蛋白与兔抗刀额新对虾MIH的多克隆抗体特异结合,证实该融合蛋白为中国明对虾MIH。通过胶内酶切与LC-ESI-MS分析进一步证实融合蛋白的部
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