【摘 要】
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目的探索长链非编码RNA（lncRNA）068对黑素瘤细胞系A375迁移的影响及潜在机制。方法2015年12月至2020年11月在南通大学附属医院皮肤科门诊收集经病理确诊的皮肤黑素瘤患者21例，采用定量PCR（qPCR）检测其黑素瘤组织与相邻癌旁组织中lncRNA068的表达。通过慢病毒转染在A375细胞中过表达或敲降lncRNA068，过表达实验分为LV-GFP组和LV-lncRNA068组，低表达实验分为LV-LacZshRNA组和LV-lncRNA068shRNA组，其中LV-GFP组和LV-Lac
【机 构】
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南通大学附属医院医学美容科，南通 226001南通大学附属医院医学美容科，南通 226001南通大学神经再生重点实验室，南通 226001南通大学附属医院医学美容科，南通 226001南通大学附属医院
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目的探索长链非编码RNA（lncRNA）068对黑素瘤细胞系A375迁移的影响及潜在机制。
方法2015年12月至2020年11月在南通大学附属医院皮肤科门诊收集经病理确诊的皮肤黑素瘤患者21例，采用定量PCR（qPCR）检测其黑素瘤组织与相邻癌旁组织中lncRNA 068的表达。通过慢病毒转染在A375细胞中过表达或敲降lncRNA 068，过表达实验分为LV-GFP组和LV-lncRNA 068组，低表达实验分为LV-LacZ shRNA组和LV-lncRNA 068 shRNA组，其中LV-GFP组和LV-LacZ shRNA组均作为对照；Transwell实验及划痕实验检测过表达或敲降lncRNA 068对A375细胞迁移的影响，EdU细胞增殖实验和CCK8法分别检测各组增殖细胞比例及细胞活力，细胞免疫荧光染色检测过表达或敲降lncRNA 068对上皮-间质转化的影响。将各组慢病毒转染的A375细胞接种于BALB/c裸鼠腋窝，每3天测量并计算肿瘤体积，30 d后处死所有裸鼠，切除肿瘤组织并测量肿瘤体积和质量。将培养的B16F10细胞接种于BALB/c裸鼠背部和足部皮下构建B16F10移植瘤模型，2周后处死裸鼠，qPCR和Western印迹法分别检测B16F10移植瘤及癌旁组织中炎症因子mRNA的表达及IKK/P65信号通路相关蛋白的表达。两组间比较采用t检验，各组间不同时间点肿瘤体积及质量的比较采用重复测量方差分析。
结果qPCR显示，人黑素瘤组织及裸鼠B16F10移植瘤组织中lncRNA 068相对表达量（0.414 ± 0.109、0.717 ± 0.041）均明显低于相应的癌旁组织（1.050 ± 0.103、1.011 ± 0.023，t = 19.48、10.83，均P
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