【摘 要】
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采用Red系统介导的同源重组方法对含有鼠β-酪蛋白基因的RPCI23-440C1 BAC进行快速改构.首先通过PCR方法,获得两端带有鼠β-酪蛋白基因同源序列的tPAm-Zeo同源重组片段,然后
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)
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采用Red系统介导的同源重组方法对含有鼠β-酪蛋白基因的RPCI23-440C1 BAC进行快速改构.首先通过PCR方法,获得两端带有鼠β-酪蛋白基因同源序列的tPAm-Zeo同源重组片段,然后将此同源重组片段电击转化至已含有编码Red重组酶质粒的RPCI23-440C1 BAC菌中,在λRed重组系统的帮助下,通过同源重组片段两端与RPCI23-440C1中β-酪蛋白同源的序列在菌体内与β-酪蛋白基因发生同源重组,将其置换.最后利用Zeocin抗性基因两侧的FRT位点,通过FLP位点专一性重组将抗性基因
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