【摘 要】
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目的:克隆并表达人自身抗原SSA/Ro60.方法:应用RT-PCR技术,从HL-60细胞株中克隆人自身抗原SSA/Ro60全长基因,将PCR产物直接TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,转
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目的:克隆并表达人自身抗原SSA/Ro60.方法:应用RT-PCR技术,从HL-60细胞株中克隆人自身抗原SSA/Ro60全长基因,将PCR产物直接TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEX-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在IPTG诱导下表达,产物行SDS-PAGE和Western blot. 结果:PCR产物约为1.6 kb,与预期1614 bp接近,测序结果与Genebank报道的完全一致.pGEX-5T- SSA/Ro60重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和Western
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