【摘 要】
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目的 构建编码人环氧合酶-2(COX-2)mRNA的shRNA真核表达载体质粒,特异性抑制人COX-2的表达.方法 以人COX-2 mRNA编码区中2条不同序列作为RNA干扰靶点,分别构建2个shRNA真核表
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科,武汉,430022
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目的 构建编码人环氧合酶-2(COX-2)mRNA的shRNA真核表达载体质粒,特异性抑制人COX-2的表达.方法 以人COX-2 mRNA编码区中2条不同序列作为RNA干扰靶点,分别构建2个shRNA真核表达载体质粒,WBH 1和WBH 2,进行酶切鉴定和测序.用脂质体转染人胃癌细胞系SGC-7901,RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测抑制效果.结果 WBH-1高效特异地抑制了人COX-2的表达,抑制率达70.42%;而WBH-2未产生抑制效果.结论 通过构建COX-2的shRNA真核表达载体导入细胞可以有效地抑制人胃癌细胞中COX-2的表达,其抑制效果与靶点的选择高度相关.
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