Akt和核因子KB信号通路在胃癌细胞化学治疗耐药中的作用

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目的 探讨Akt、核因子(NF)-kB信号通路在胃癌细胞化学治疗耐药中的作用,以及Akt、NF-kB信号通路的相互作用关系。方法采用化学治疗药物阿霉素、足叶乙甙及两药联合应用Akt抑制剂(Wortmannin)或NF-kB抑制剂(MG-132)分别作用于胃癌细胞(SGC-7901)。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测SGC-7901细胞增长率;TUNEL法和膜联蛋白V/碘化丙啶(PI)双标法检测肿瘤细胞凋亡;免疫细胞化学法检测NF-kB/P65蛋白表达;电泳迁移率实验(EMSA)法检测NF-kB-DNA结合活性的变化;Western印迹法检测磷酸化Akt或磷酸化NF—KB抑制因子(IxB)a蛋白的表达。结果①阿霉素和足叶乙甙均能明显抑制SGC-7901细胞的生长,并呈时间、剂量依赖性;分别联合应用Wortmannin或MG-132后能进一步抑制其生长。②化学治疗药物剂量依赖性地诱导SGC-7901细胞凋亡和NF—xB或Akt活化,联合应用MG-132或Wortmannin均能增强化学治疗药物的诱导凋亡作用和抑制NF-kB或Akt活化作用。③Wortmannin可明显抑制NF-kB的活化,而MG-132对Akt的活化无明显影响。结论化学治疗药物诱导SGC7901细胞凋亡的同时诱导Akt、NF-kB活化,抑制Akt、NF-kB的活化可增加化学治疗药物的疗效。

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