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用新活化的斜面菌种经一级种子培养后，离心沉降10min（3000r／min），弃去上清液，加入无菌水捣匀菌体，再弃去上清液，加入pH7．0的0．1mol／L磷酸缓冲液至原体积，用浓度为1％（V／V）的硫酸二乙酯处理40min左右，用硫代硫酸钠中止或水稀释后，进行一级培养，单菌落分离，按常规筛选。