【摘 要】
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主要是探讨水牛卵母细胞的体外成熟与供体的年龄和性别对其核移植效果的影响.体外成熟培养22～24 h的水牛卵母细胞,在含有5 μg/mL细胞松弛素的操作液中进行去核,然后将经0.1
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主要是探讨水牛卵母细胞的体外成熟与供体的年龄和性别对其核移植效果的影响.体外成熟培养22～24 h的水牛卵母细胞,在含有5 μg/mL细胞松弛素的操作液中进行去核,然后将经0.1 μg/mL蚜栖菌素( Aphidicolin,APD)培养处理24 h,再用0.5% 胎牛血清(FBS)培养2 d的水牛耳皮成纤维细胞注射到去核的卵母细胞卵周隙中,再经电融合形成重构胚.重构胚经5 μmol/L离子霉素激活处理5 min并在2 mmol/L的二甲氨基嘌呤(6-DMAP)中培养3 h后,在含有颗粒细胞单层细胞的微滴中(30 μL)培养7 d,观察其卵裂和胚胎发育情况.结果显示:在添加有10 ng/mL上皮生长因子(EGF)成熟液中培养的受体水牛卵母细胞的融合率和重组胚卵裂率与对照组无显著差异(P>0.05),但其囊胚发育率明显高于对照组(18.53% vs.7.56%,P 0.05),但水牛胎儿体细胞构建的重组胚囊胚率显著高于成年体细胞﹙22.55% vs.10.77%和8.09%,P
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