【摘 要】
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目的 应用以菌落为模板的聚合酶链反应 (PCR)技术筛选插有小鼠Doc 1R基因组序列的重组阳性克隆。方法 应用扩增小鼠Doc 1R基因组序列时使用的引物 ,以基因重组扩增后得到的
【机 构】
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中国医科大学实验动物部; 中国医科大学细胞生物学重点实验室; 中国医科大学实验动物部 110001沈阳中国医科大学附属第一医院妇科; 110001沈阳;
【基金项目】
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国家“九五攻关”项目 (96 A2 3 0 60 2 );国家自然科学基金 (3 9980 0 11)
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目的 应用以菌落为模板的聚合酶链反应 (PCR)技术筛选插有小鼠Doc 1R基因组序列的重组阳性克隆。方法 应用扩增小鼠Doc 1R基因组序列时使用的引物 ,以基因重组扩增后得到的菌落为模板 ,直接进行PCR扩增。结果 在筛选的 5个菌落中有 3个可见到 15 0 0bp大小的阳性条带与Doc 1R基因片段大小一致的阳性克隆 ,并对此 3个阳性克隆分别提取质粒 ,进一步进行双酶切及序列分析鉴定 ,证明结果正确。结论 菌落PCR用于筛选重组阳性克隆是一种简便、快速、可靠、有效的方法
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