【摘 要】
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目的 构建基于核酸负载纳米金（AuNPs）的酶联免疫吸附试验（ELISA）高灵敏检测平台。方法 将生物素化DNA通过金-硫键结合在AuNPs上，制备纳米金生物素化DNA（AuNPs@DNA-B）信号探针，在ELISA检测目标分子的基础上，使信号探针通过链霉亲和素结合于夹心复合物中的生物素化抗体上，发挥信号放大作用，实现对目标分子的高灵敏检测。该研究选用血清水平极低的抗体免疫球蛋白（Ig）E作为目标
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81560006）； 海南省自然科学基金高层次人才项目（820RC65）； 大学生创新创业项目（X201911810004）；
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目的 构建基于核酸负载纳米金（AuNPs）的酶联免疫吸附试验（ELISA）高灵敏检测平台。方法 将生物素化DNA通过金-硫键结合在AuNPs上，制备纳米金生物素化DNA（AuNPs@DNA-B）信号探针，在ELISA检测目标分子的基础上，使信号探针通过链霉亲和素结合于夹心复合物中的生物素化抗体上，发挥信号放大作用，实现对目标分子的高灵敏检测。该研究选用血清水平极低的抗体免疫球蛋白（Ig）E作为目标分子，验证该检测平台的可行性。结果 通过紫外光谱扫描、透射电镜观察，发现制备的AuNPs颗粒大小均匀、分散性好。在最优条件下，该方法对选定的目标分子IgE的最低检测限为0.012 ng/mL;批内变异系数＜2.0%,批间变异系数＜6.1%;该方法的回收率为（99.956±0.168）%～（104.733±3.376）%,传统ELISA为（99.100±0.529）%～（100.044±0.276）%,差异无统计学意义（P＞0.05）。其检测灵敏度与化学发光法相近。结论 该研究成功构建了基于AuNPs@DNA-B的信号放大ELISA高灵敏检测平台。
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