【摘 要】
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为获得植物乳杆菌G63高效的电转化方法,本研究从细胞生长状态、细胞弱化剂质量浓度、洗涤液、质粒添加量和电击参数等方面对菌株G63的电转化效率进行优化。结果表明:取菌株G6
【机 构】
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东南大学附属第二医院生物治疗中心,沈阳农业大学植物保护学院,南京农业大学生命科学学院
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为获得植物乳杆菌G63高效的电转化方法,本研究从细胞生长状态、细胞弱化剂质量浓度、洗涤液、质粒添加量和电击参数等方面对菌株G63的电转化效率进行优化。结果表明:取菌株G63对数生长中期的细胞制备感受态,以1 g/100 m L甘氨酸作为细胞弱化剂,分别用1 mmol/L Mg Cl2和30 g/100 m L聚乙二醇1000洗涤细胞,并用30 g/100 m L聚乙二醇1000作为电击液,加入20μg穿梭质粒,在1.5 k V和400Ω条件下进行电击,可以获得最高的电转化效率,转化效率达到1.18×103 CFU/μg DNA,满足后续遗传学实验要求。
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