【摘 要】
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目的:建立邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生反相高效液相色谱荧光检测法,同时测定大鼠血浆和脑脊液中5-羟色氨酸（5-HTP）,γ-氨基丁酸（GABA）,色氨酸（Trp）,缬氨酸（Val）,异亮氨酸（Ile）和亮氨酸（Leu）6种
【机 构】
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河北医科大学药学院,承德医学院中药研究所
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目的:建立邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生反相高效液相色谱荧光检测法,同时测定大鼠血浆和脑脊液中5-羟色氨酸（5-HTP）,γ-氨基丁酸（GABA）,色氨酸（Trp）,缬氨酸（Val）,异亮氨酸（Ile）和亮氨酸（Leu）6种与运动疲劳相关氨基酸。方法:样品经甲醇沉淀后,以OPA进行柱前衍生。色谱柱为Phenomenex C18（250×4.6 mm,5μm）,以A甲醇-B0.05 mol/L NaAc·3H2O（pH6.0,内含0.05%THF）为流动相进行梯度洗脱,柱温30℃,λex为340 nmn,λem为450 nm。结果:在上述色谱条件下,5-HTP、GABA、Trp、Val、Ile、Leu和内源性物质在22.5min内分离度良好;6种氨基酸分别在2.87～368μmlol/L、6.31～807μmol/L、2.04～262μmol/L、3.52～451μmol/L、2.58～331μmol/L、2.54～326μmol/L的范围内呈良好的线性关系;运动过度组中上述6种氨基酸含量均比对照组高。结论:本法简便灵敏,结果准确可靠,可以快速地测定大鼠血浆和脑脊液中6种运动疲劳相关氨基酸的含量,为准确地反映中枢神经系统的活动状态和变化提供合理的依据。
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