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猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白的高效表达及间接ELISA方法的建立

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gdw2009

【摘 要】

：

根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株ATCCVR2332的N蛋白基因序列，设计合成1对特异性引物，用RT-PCR方法从PRRSVHn-1／06株中克隆了大小为372bp的N蛋白基因（EU025136）。

【作 者】

：

夏平安 尹彦涛 李素平 党占国 王建举 王中明 李伟娟 崔保 

【机 构】

：

河南农业大学牧医工程学院

【出 处】

：

中国兽医学报

【发表日期】

：

2009年5期

【关键词】

：

PRRSV N蛋白 原核表达 ELISA PRRSV  N protein  prokaryotic expression  ELISA 

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根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）美洲株ATCCVR2332的N蛋白基因序列，设计合成1对特异性引物，用RT-PCR方法从PRRSVHn-1／06株中克隆了大小为372bp的N蛋白基因（EU025136）。将N蛋白基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-N，在IPTG的诱导下成功表达了相对分子质量约为33000的可溶性融合蛋白N-His；经SDS-PAGE和凝胶薄层扫描分析，融合蛋白的表达量约占细菌总蛋白量的29％。将融合蛋白加入镍琼脂糖凝胶树脂层析柱，经3

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