九节茶ISSR反应体系的建立及优化

来源 :福建农林大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ycyujing
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以九节茶叶片提取的基因组DNA为材料,对影响ISSR-PCR扩增效果的一些因素,诸如dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶用量、引物用量、模板DNA用量、退火温度以及循环次数等指标进行筛选和优化.结果表明:20μL ISSR反应体系含10×PCR Buffer、0.4mmol·L^-1dNTPs、2U TaqD NA聚合酶、0.6μmol·μL^-1引物、5ng模板DNA;PCR扩增程序为:94℃预变性2min,94℃变性30s,44.8℃退火30s,72℃延伸1min,35个循
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