弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA4基因的克隆与表达

来源 :中国人兽共患病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:quzg2008
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目的克隆和表达弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA4基因.方法根据GRA4基因序列,设计合成一对引物,用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因片段,插入pMD18-T载体,并转化大肠杆菌JM109,经PCR、双酶切、测序验证后,将GRA4基因片段定向亚克隆到载体pGEX-4T-2中构建原核表达重组质粒pGEX-4T-2-GRA4,重组子在E.coli BL21中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE及Western blot分析.结果从弓形虫RH株基因组DNA中扩
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