【摘 要】
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为探索电荷异构体的结构基础及其对生物学功能的影响,利用阳离子交换层析法分离制备了阿达木单抗的4个电荷异构体组分,通过液质联用进行结构表征,考察了生物学功能.结果表明,制备的电荷异构体具有较高的纯度、稳定性和相同的氨基酸序列;酸性变异体主要与聚集体、碎片、N-糖唾液酸化、脱酰胺水平升高和氧化比例降低有关;碱性变异体主要由聚集体、碎片、C-末端赖氨酸缺失不完全和氧化比例降低引起;电荷异质性未影响TNF-α结合活性和细胞死亡抑制活性.因此,电荷异构体不能被定义为杂质.
【机 构】
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浙江大学 药学院, 浙江 杭州 310058;浙江博锐生物制药有限公司, 浙江 台州 318000;浙江博锐生物制药有限公司, 浙江 台州 318000;浙江大学 药学院, 浙江 杭州 310058
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为探索电荷异构体的结构基础及其对生物学功能的影响,利用阳离子交换层析法分离制备了阿达木单抗的4个电荷异构体组分,通过液质联用进行结构表征,考察了生物学功能.结果表明,制备的电荷异构体具有较高的纯度、稳定性和相同的氨基酸序列;酸性变异体主要与聚集体、碎片、N-糖唾液酸化、脱酰胺水平升高和氧化比例降低有关;碱性变异体主要由聚集体、碎片、C-末端赖氨酸缺失不完全和氧化比例降低引起;电荷异质性未影响TNF-α结合活性和细胞死亡抑制活性.因此,电荷异构体不能被定义为杂质.
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