【摘 要】
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目的利用反向遗传学原理构建B、E型肉毒神经毒素（BoNT）基因型特异性靶片段质粒、菌株。方法自GenBank获取BoNT基因序列,利用DNAMAN、Lasergene、Vector NTI等多种生物信息学分
【机 构】
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南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系,南方医科大学南方医院检验科
【基金项目】
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广东省重大专项子课题（2006B33761002）
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目的利用反向遗传学原理构建B、E型肉毒神经毒素（BoNT）基因型特异性靶片段质粒、菌株。方法自GenBank获取BoNT基因序列,利用DNAMAN、Lasergene、Vector NTI等多种生物信息学分析软件和BLAST等网上数据分析平台进行综合分析,以锚定BoNT/B与BoNT/E基因中的型特异性靶片段,分别设计合成5条和10条DNA短链,经重叠PCR扩增获得完整的靶片段,纯化后连接到pMD18-T载体上,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,质粒提取后进行酶切和测序鉴定。结果分析了全球已报道的60条
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