论文部分内容阅读
【目的】构建针对HIF-1α基因的短发夹干忧RNA真核表达质粒,探讨低氧条件下其对卵巢癌SKOV3细胞定植和侵袭能力的影响。【方法】根据siRNA设计原则,结合psilencer 2.1-U6-neo质粒特点,针对HIF-1α基因设计并合成2条寡聚DNA片段,退火后将其克隆人DSilencer2.1-U6-neo质粒中,采用脂质体法将重组真核表达质粒转染人卵巢癌SKOV3细胞。缺氧培养后,应用实时定量PCR和Western blotting方法检测HIF-1α蛋白及mRNA表达水平;用软琼脂克隆形成实验和