【摘 要】
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目的 利用基因工程技术表达人骨形态发生蛋白4(hBMP4),为深入研究其结构、诱骨机理及临床应用将起积极作用。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增出hBMP4成熟区
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目的 利用基因工程技术表达人骨形态发生蛋白4(hBMP4),为深入研究其结构、诱骨机理及临床应用将起积极作用。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增出hBMP4成熟区基因,将其克隆于表达载体pBV220的 PRPL启动子下游。分别经随机挑选、限制性内切酶酶切鉴定及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）筛选证实得到5株重组质粒pBV/BMP4的转化菌株,以非融合蛋白形式表达了hBMP4。结果 SDS-PAGE显示,此蛋白相对分子量为14,表达量占菌体蛋白的15.6%；细胞培养碱性磷酸酶(ALP)活性测定证明,细胞分泌ALP的活性与rhBMP4浓度呈剂量依赖关系。[ HT5”H〗结论 hBMP4在大肠杆菌中的表达产物复性后具有生物学活性,确证为h BMP4蛋白。
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