观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1抑制剂VX765对冷束缚诱导小鼠急性胃溃疡胃黏膜的保护效应。
方法将24只无特殊病原体级雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、冷束缚组、VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组，每组6只。正常对照组小鼠仅在腹腔内注射10 mL/kg二甲基亚砜(DMSO)和PBS混合液。冷束缚组小鼠在腹腔内注射DMSO和PBS混合液，30 min后行冷束缚实验诱导急性胃溃疡。VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组小鼠同前造成急性胃溃疡，实验前30 min分别腹腔注射含10 mg VX765的DMSO、PBS混合液(12.5 μmol/kg)及含20 mg雷贝拉唑的PBS、DMSO混合液(40 mg/kg)。冷束缚实验结束后4 h，采用ELISA法测定血清TNF－α、IL－6含量，观察胃组织的大体情况、评估溃疡指数、行HE染色观察胃组织的病理学变化，采用蛋白质印迹法检测胃组织中IL－1β、IL－18及剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的相对表达量。正常对照组小鼠于相同时相点同前检测。对数据行单因素方差分析、Bonferroni检验。
结果正常对照组小鼠血清中TNF－α和IL－6含量和胃组织中剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1、IL－1β、IL－18含量均明显低于冷束缚组(P值均小于0.01)。VX765预处理＋冷束缚组小鼠血清和胃组织中的前述炎性指标含量均明显低于冷束缚组(P值均小于0.01) 。雷贝拉唑预处理＋冷束缚组与冷束缚组小鼠血清和胃组织中的前述炎性指标含量比较，差异均无统计学意义(P值均大于0.05)。VX765预处理＋冷束缚组小鼠血清和胃组织中的前述炎性指标含量均明显低于雷贝拉唑预处理＋冷束缚组(P值均小于0.01)。正常对照组小鼠胃黏膜表面光滑平整，黏膜细胞形态正常、结构清晰。冷束缚组小鼠多发性胃黏膜出血，黏膜细胞排列混乱，坏死组织周围有大量炎性细胞浸润。VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组小鼠胃黏膜出血数目显著减少、黏膜结构尚完整，坏死组织周围有少量炎性细胞浸润。正常对照组、冷束缚组、VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组小鼠的溃疡指数分别为0、18.7±1.1、6.3±1.5、8.2±1.3；其中正常对照组明显低于其余3组(P值均小于0.05)，VX765预处理＋冷束缚组与雷贝拉唑预处理＋冷束缚组相近(P>0.05)，该2组均明显低于冷束缚组(P值均小于0.05)。
结论VX765可以有效阻断半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的活化、减少炎症因子的生成、减轻炎症反应，对冷束缚诱导小鼠急性胃溃疡胃黏膜有一定的保护作用。