【摘 要】
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利用PCR方法从猪链球菌2型四川资阳分离株449-1扩增出sp基因,克隆到pMD18-T载体中,构建出克隆载体pMDl8T-sp.以SalⅠ和BamHⅠ从pMD18T-sp中切下目的印基因片段并克隆到质粒pM
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,军事医学科学院军事兽医研究所
【基金项目】
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国家“973”计划项目(2006CB504400)
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利用PCR方法从猪链球菌2型四川资阳分离株449-1扩增出sp基因,克隆到pMD18-T载体中,构建出克隆载体pMDl8T-sp.以SalⅠ和BamHⅠ从pMD18T-sp中切下目的印基因片段并克隆到质粒pMAL-p2X中,构建重组表达质粒pMALp2X-sp,转化宿主茵TB1中进行诱导表达.分析表明sp基因序列比GenBank报道序列AY864331少了270 bp;SDS-PAGE电泳检测结果表明,重组菌株表达出了136 Ku左右的目的蛋白MBP-Sao,目的蛋白为可溶表达,约占菌体蛋白总量的12.3
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