小鼠神经生长因子基因重组腺病毒的构建及其在基底膜上的表达

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目的构建具有生物学活性的小鼠神经生长因子(nervegrowthfactor,13NGF)基因重组腺病毒表达载体,并研究其在耳蜗基底膜上的表达特性。方法利用逆转录多聚酶链反应(RT—PCR)从小鼠颌下腺总mRNA中扩增βNGF全长cDNA片断,定向克隆于携带巨细胞启动子(CMV)和标记蛋白-绿色荧光蛋白(eGFP)的腺病毒穿梭质粒pAdtrack中;在细菌中与缺陷型腺病毒基因组pAdeasy-1进行同源重组,构建pAdeasy-1,pAd—track—CMV—eGFP—mβNGF:在HEK293细胞中包装
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